1. Renata Ališić, Паневропски Универзитет Аперион Бања Лука,
Republic of Srpska, Bosnia and Herzegovina
Uvod: Kiseonik, kao krajnji akceptor elektrona u procesu respiracije je nephodan za život, ali isto tako može biti veoma opasan. U normalnim metaboličkim procesima dolazi do nastanka reaktivnih vrsta kiseonika (superoksid anion radikal, vodonik peroksid), a u uslovima stresa (hipoksija, toksične supstance) njihova je proizvodnja značajno povećana što može dovesti do oštećenja ćelija. U skoro svim aeorobnim ćelijama jedan od najvažnijih enzima antioksidativne zaštite je superoksid dismutaza (SOD, EC 1.15.1.1). Superoksid dismutaza je oksido-reduktaza koja katalizuje dismutaciju superoksida (O2.) do vodonik peroksida i vode. Postoji nekoliko superoksid dismutaznih izoformi u zavisnosti od metalnog kofaktora koji ulazi u njihov sastav.
Cilj: Cilj rada je bio da se iz eritrocita klena izoluju superoksid dismutaze i da se nativnom elektroforezom odredi broj izoformi.
Materijal i metode: U ekpserimentima je korištena krv klena (Squalius cephalus). Nakon izdvajanja krvne plazme SOD je iz hemolizata eritrocita izolovana smješom organskih rastvarača (hloroforma i etanola). Nativnom elektroforezom su na poliakrid-amidnom gelu razdvojene SOD izoforme i vizuelizirane uz pomoć NBT- a (nitro-blutetrasolium) i riboflavina.
Rezultati: Na gelu za nativnu elektroforezu su u hemolizatu detektovane dvije SOD izoforme označene sa SOD1 ( Rf 0.47) i SOD2 (Rf 0.59). U hloroformskoj frakciji je detektovana jedna izoforma koja po svojoj Rf vrijednosti odgovara izoformi SOD2 iz hemolizata.
Zaključak: Dobijeni rezultati ukazuju na to da organski rastvarači ne utiču na aktivnost SOD2 izoforme iz eritrocita klena i da se ova procedura može koristiti za prečišćavanje enzima. Mogući razlozi zašto u hloroformskoj frakciji nije detektovana SOD1 izoforma su inaktivacija enzima ili promjena njenih karakteristika (rastvorljivost).
Ključne riječi: klen, eritrociti, superoksid dismutaza, organski rastvarači
Кључне речи :
Тематска област:
Природне науке
Датум:
05.11.2012.
Бр. отварања:
635
5. naučno-stručni skup Studenti u susret nauci sa međunarodnim učešćem - STES
